第一节 革兰阳性球菌[第3页/共5页]
1.直接镜检:无菌操纵取脓汁、痰、排泄物和脑脊液(离心后取沉渣)涂片,经革兰染色后镜检,如为革兰阳性球菌呈葡萄状摆列可初诊。初报为:“找到革兰阳性葡萄状摆列球菌,疑为葡萄球菌”。
(2)血浆凝固酶实验:血浆凝固酶是金黄色葡萄球菌所产生的一种与其致病力有关的侵袭性酶,分游离型和连络型两种。其感化是使血浆中的纤维蛋白在菌体大要堆积和凝固以停滞吞噬细胞的吞噬。可别离用试管法和玻片法检测。玻片法用于粗筛,若玻片法为可疑或阳性成果,还需用试管法确证。
3.脓汁、尿道分泌物、脑脊液离心沉淀物,凡是可直接接种血琼脂。37℃18~24h,可见直径2~3mm,产生分歧色素的菌落。金黄色葡萄球菌在菌落四周有透明的溶血环。
葡萄球菌属(Staphylococcus)
2.临床尝试室葡萄球菌属药敏实验普通挑选以下抗生素:A组为苯唑西林、青霉素;B组为红霉素、复方新诺明、万古霉素;C组选用环丙沙星、庆大霉素、氯霉素、利福平;U组为诺氟沙星、呋喃妥因。普通不必挑选青霉素、苯唑西林以外的β-内酰胺类抗生素。这是因为:青霉素敏感的葡萄球菌对其他青霉素类、头孢菌素类和碳青霉烯类也是敏感的;青霉素耐药而苯唑西林敏感的菌株对青霉素酶不稳定的青霉素类耐药,但对其他青霉素酶稳定的青霉素类、β-内酰胺类、β-内酰胺酶按捺剂复合物、第一代头孢菌素类和碳青霉烯类是敏感的;苯唑西林耐药的葡萄球菌对统统当前可用的β-内酰胺类抗生素均耐药,凡是还对氨基糖苷类、大环内酯类、克林霉素、四环素等多重耐药。是以,仅测试青霉素和苯唑西林便能够推知一多量β-内酰胺类抗生素的敏感性与耐药性,不必通例测试其他青霉素类、β-内酰胺酶按捺剂复合物、头孢菌素类和亚胺培南。对MRS轻度传染可用利福平、复方磺胺甲噁唑和环丙沙星,而严峻的满身传染只能用万古霉素。
2.分离培养:血液标本(静脉血约5ml)注入50ml葡萄糖肉汤或含硫酸铁肉汤增菌培养,敏捷摇匀,以防凝固,置37℃,普通于24h后开端察看有无细菌发展,若均匀浑浊,溶血及胶状发展,则接种于血琼脂,进一步鉴定,若无细菌发展,于48~72h后每天察看(普通以7天为限),并接种血琼脂,以肯定有无细菌发展。血液标本 也可注入商品血培养瓶培养。
VanC为天然耐药,对万古霉素低程度耐药。比来又有获得性Vane型VRE的报导。对VanA型、青霉素敏感或低耐药的非HLAR菌株,可用青霉素+庆大霉素。对VanB非HLAR的菌株,用替考拉宁+庆大霉素;同时有HLAR的菌株,用替考拉宁、重生霉素+喹诺酮类。对多重耐药的VRE菌,目前尚无有效的医治体例,可谓超等细菌。
2.分离培养:血液标本,以无菌操纵取两份血液各5~lOml,分 别注入增菌培养基,别离置需氧和厌氧环境中增菌,然后别离接种于两个血平板,置需氧和厌氧环境中培养。脓汁、咽拭等标本接种血平板、巧克力平板,置C02环境培养;上述的培养物经37℃18~24h培养后,察看菌落特性和溶血环境。链球菌的菌落凡是较小,透明或半透明,似针尖大小、凸起,菌落四周可呈现仪一溶血或b-溶血,也可不呈现溶血。然后取可疑菌落经涂片、染色镜检证明。甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌可产生α溶血。它们的菌落形状非常类似,应予以辨别。